1991年加入TVB,演出第一部电视剧《浪族阔少爷》。1992年演出电影处女作《飞虎精英之人间有情》,凭此片入围香港电影金像奖最佳新演员奖;参与演出TVB电视剧《壹号皇庭》。根据官方资料统计,1997-2007年,郑秀文个人累积票房近3亿7千万港元,其中2001年推出的《瘦身男女》香港票房超过4000万。1998年,影视方面,sammi与古天乐、宣萱合演了TVB港剧《宠物情缘》。1999年5月与刘德华合作的一部广播剧《孤男寡女》,后改拍成电影。
2000年,郑秀文开拓了个人的演艺事业。夏天,由sammi主演的两部电影《孤男寡女》和《夏日的么么茶》香港票房超过5600万,分别占据年度十大港产片票房排行榜的第1位和第4位,获得香港电影金像奖、台湾电影金马奖及亚太影展影后提名。2001年由郑秀文主演的三部电影《瘦身男女》、《钟无艳》、《同居密友》分别位列年度十大港产片票房排行榜的第2位、第4位和第8位。2002年,郑秀文以《同居蜜友》、《瘦身男女》、《钟无艳》三部电影同时提名香港电影金像奖“最佳女主角”奖项。在同年,sammi凭《钟无艳》夺得2001年度第八届香港电影评论学会最佳女演员奖项。2002年sammi有两部电影《嫁个有钱人》和《我左眼见到鬼》上映,在年度十大港产片票房排行榜中占据第2位及第3位,并凭《我左眼见到鬼》获得金马奖提名最佳女主角奖项及获提名最佳原创电影歌曲。其后,sammi友情演出电影《无间道》。2002年,郑秀文凭着《钟无艳》夺得第八届香港电影评论学会最佳女演员奖项。郑秀文也曾出演电视剧,包括《壹号皇庭》、《刑事侦缉档案II》、《宠物情缘》等。2003年,与古天乐合作演出的贺岁电影《百年好合》于农历新年期间上映,在暑期,再次与古天乐以及刘青云、蔡卓妍合作演出电影《恋上你的床》,其后,再度友情演出电影《无间道III之终极无间》。2004年与言承旭、刘德华合作演出的贺岁电影《魔幻厨房》于农历新年期间上映,同年再次与刘德华合作演出电影《龙凤斗》,之后参与拍摄电影《长恨歌》。
2005年,6月11日郑秀文正式加盟东亚唱片,同年以电影《长恨歌》参加威尼斯影展角逐影后,未能获奖。2007年,复出拍摄首部电影《查之女》。2008年接拍与陈奕迅搭档合作的电影《大搜查》,并且担任香港国际电影节大使。4月13日,与郑裕玲、吴君如一同主持第27届香港电影金像奖颁奖典礼。12月13日及12月15日,与东亚群星演出"东亚华星演唱会"。12月23日,电影《大搜查》在中国内地上映。
2011年,接拍杜琪峰执导的浪漫爱情电影《高海拔之恋Ⅱ》,再度与古天乐合作,并首度与内地演员高圆圆以及王宝强合作,影片在云南香格里拉取景拍摄。《高海拔之恋Ⅱ》在2012年情人节前夕上映。2013年,郑秀文凭《高海拔之恋Ⅱ》获得第32届香港电影金像奖“最佳女主角”提名,同时亦入选第13届华语电影传媒大奖“最佳女主角”最后五强。与刘德华第7度合演的电影《盲探》入围第66届戛纳电影节“午夜展映”单元,并在当地时间5月20日零点举办了首映,该片已于7月4日在中国内地及香港地区同步上映。2013年1月1日电影《大搜查》在香港上映,成为香港票房排行榜冠军。2014年,主演爱情喜剧《临时同居》,搭档演员张家辉、Angelababy(杨颖)、欧豪等。4月,凭借电影《盲探》获得第33届香港电影金像奖最佳女主角奖提名;9月,凭借电影《盲探》获得第14届华语电影传媒大奖最佳女主角奖提名。
2015年,搭档张孝全主演都市爱情电影《婚前合约》,饰演事业有成的叶瑾;2月19日,主演电影《冲上云霄》上映。2016年5月19日,由亚洲星光娱乐主办的“致青春”音为走心演唱会的首发阵容公布,郑秀文入围。10月1日,客串电影《王牌逗王牌》上映。2017年参演电影《合约男女》。2018年参演电影《圣荷西谋杀案》、《午夜慢车》、《栋笃特工》。2019年参演电影《你咪理,我爱你!》。2019年9月12日,与赖雅妍、李晓峰领衔主演电影《花椒之味》上映,片中饰演女主角夏如树。
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